市场价格：￥2800.00

所属品牌：HNZQING

产品货号：ZQ- 220120

产品规格：96T

适用情况：仅供科研使用，不得用于临床诊断

目的:探讨CXC趋化因子配体8[chemokine(C-X-C motif)ligand 8,CXCL 8]基因沉默对结肠癌细胞增殖和侵袭的影响,以及磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,PKB,又称Akt)/核因子κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)信号转导途径在其中所起的作用.方法 :应用RT-PCR和蛋白质印迹法检测CXCL8在4种结肠癌细胞株HT-29,Wi Dr,Ca Co-2和Co Lo320中的表达水平.应用Lipofect AMINE2000脂质体转染法将靶向CXCL 8基因的小干扰RNA(small interfering RNA,si RNA)转染至4种结肠癌细胞,然后采用蛋白质印迹法检测CXCL8蛋白的表达.WST-1法和Transwell小室实验分别检测CXCL 8基因沉默对4种结肠癌细胞增殖和侵袭能力的影响.蛋白质印迹法检测CXCL 8基因沉默后HT-29细胞中PI3K/Akt/NF-κB通路主要蛋白的磷酸化水平的变化.结果 :CXCL8在4种结肠癌细胞株中均高表达,而CXCL8 si RNA转染后CXCL8蛋白表达均被明显抑制(P值均0.01).转染CXCL8 si RNA后结肠癌细胞的增殖和侵袭能力均明显降低(P值均0.01).HT-29细胞中CXCL 8基因沉默可明显抑制CXCL8诱导的PI3K,Akt和NF-κB蛋白磷酸化(P值均0.01).结论 :CXCL8基因沉默能够显著抑制结肠癌细胞的增殖和侵袭,推测其机制与下调PI3K/Akt/NF-κB信号通路蛋白的活化相关.

ELISA试剂盒的组分：

（1）已包被抗原或抗体的固相载体（免疫吸附剂）；

（2）酶标记的抗原或抗体（结合物）；

（3）酶的底物；

（4）阴性对照品和阳性对照品（定性测定中），参阅标准品和控制血清（定量测定中）；

（5）结合物及标本的稀释液；

（6）洗涤液；

（7）酶反应终止液。

ELISA方法的基本原理是：

①使抗原或抗体结合到某种固相载体表面，并保持其免疫活性。

②使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体，这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性，又保留酶的活性。在测定时，把受检标本(测定其中的抗体或抗原)和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其他物质分开，蕞后结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一定的比例。加入酶反应的底物后，底物被酶催化变为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据颜色反应的深浅刊物定性或定量分析。由于酶的催化频率很高，故可放大反应效果，从而使测定方法达到很高的敏感度。因此，ELISA检测是一项定位、定性和定量(敏感度可达每毫升ng~pg的水平)的综合技术。常用的酶是辣根过氧化物酶(HRP)和碱性磷酸酶(AKP)